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大家好,今天来为大家解答免疫组化技术这个问题的一些问题点,包括免疫组化的操作步骤也一样很多人还不知道,因此呢,今天就来为大家分析分析,现在让我们一起来看看吧!如果解决了您的问题,还望您关注下本站哦,谢谢~
免疫组化的操作步骤
一免疫组化(SP法)操作步骤
1.切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行
2.缓冲液洗3min/2次。
3.为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色,将切片放在HydrogenPeroxideBlock中孵育10-15分钟。
4.缓冲液洗5min/2次。
5.滴加UltraVBlock,在室温下孵育5分钟以封闭非特异性的背景染色。
(注:孵育不要超过10分钟,否则会导致特异性染色降低。如果一抗的稀释液中含有5-10%正常羊血清,这一步可以省略。)
6.缓冲液洗5min/2次。
7.滴加一抗工作液37℃孵育1-2小时。(具体孵育时间和温度由试验者最终决定)
8.缓冲液洗5min/2次。
9.滴加PrimaryAntibodyEnhancer(增强子),在室温下孵育20分钟。
10.缓冲液洗5min/2次。
11.滴加HRPPolymer(酶标二抗),在室温下孵育30分钟。
(注:HRPPolymer对光敏感,应避免不必要的光暴露并储存在不透明的小瓶中。)
12.缓冲液洗5min/2次。
13.向1mlDABPlusSubstrate(或AECPlusSubstrate)中滴加1-2滴DABPlusChromogen(或AECPlusChromogen),混匀后滴加到切片上,孵育3-15分钟。(具体时间由染色深浅决定。)
14.自来水充分冲洗,复染,脱水,透明,封片。⑴、石蜡切片脱蜡至水。
⑵、3%H2O2室温孵育5-10分钟,以消除内源性过氧化物酶的活性。
⑶、蒸馏水冲洗,PBS浸泡5分钟x2(如需抗原修复,可在此步后进行)。
⑷、5-10%正常山羊血清(PBS稀释)封闭,室温孵育10分钟,倾去血清,勿洗。滴加一抗工作液,37℃孵育1-2小时或4℃过夜。
⑸、PBS冲洗,5分钟x3次。
⑹、滴加适量生物素标记二抗工作液,37℃孵育10-30分钟。
⑺、PBS冲洗,5分钟x3次。
⑻、滴加适量的辣根酶或碱性磷酸酶标记的链霉卵白素工作液,37℃孵育10-30分钟。
⑼、PBS冲洗,5分钟x3次。
⑽、显色剂显色3-15分钟(DAB或NBT/BCIP)
⑾、自来水充分冲洗,复染,脱水,透明,封片。冰冻切片4-8μm,室温放置30分钟后,入4℃丙酮固定10分钟,PBS洗,5分钟x3,用过氧化氢孵育5-10分钟,消除内源性过氧化物酶的活性。
免疫组化技术的优点不包括
【答案】:D
免疫组化技术重要的特点是形态学的直观性,用于抗原表达的定性分析,不能精确定量。
什么是免疫组化
问题一:免疫组化是什么意思免疫组化就是看看癌肿细胞是什么类型的。因为不同类型肿瘤对放化疗敏感程度不同。
问题二:什么是免疫组化检查免疫组化是免疫组织化学方法的简称。临床上的免疫组化检查是指应用免疫学基本原理――抗原与抗体特异性结合,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色,从而确定组织细胞内的抗原(多肽和蛋白质),并对其进行定位、定性及定量。
乳腺癌诊断过程中的免疫组化检查就是指应用上述免疫组化技术来检测乳腺癌组织细胞中的某些特定蛋白质。这些蛋白质的存在与否,不仅有助于确定肿瘤是哪种类型,还能够为临床医师提供乳腺癌分子分型的重要依据。这些免疫组化的检测结果反映了乳腺癌的生物学特点,具有非常重要的预测预后意义与指导治疗的价值。每一位患者的肿瘤乃至同一肿瘤的不同部分,其免疫组化的表达可能都不同。因此,乳腺癌的治疗方案不是人人相同,做免疫组化检查正是为了了解肿瘤是否具备某些特性,用以针对性地制订治疗方案,以达到最好的治疗效果。免疫组化检查结果也是评估患者复发转移风险的重要指标之一,临床医师根据这些结果综合判断手术后的后续治疗是否需要化疗、内分泌治疗或靶向治疗。如果需要化疗,那么什么药、怎么用药、用几个疗程等等问题。都需要参考包括免疫组化报告在内的各项指标来确定。因此,临床医师在制订治疗方案之前需要阅读免疫组化报告。
问题三:做免疫组化的意思是什么?免疫组织化学(Immunohistochemistry)又称免疫细胞化学它是组织化学的分支它是用标记的特异性抗体(或抗原)对组织内抗原(或抗体)的分布进行组织和细胞原位检测技术故其准确性比较高免疫组化是根据阳性的指标来诊断肿瘤的免疫组化比起镜检诊断更加准确客观您上面有CK(++)CK10(+++)Vim(+++)这三项是阳性如果取自肾脏约两公分的包块说明可能与肾脏有关但这个要由病理科医生来诊断
问题四:什么是免疫组化免疫组化,是应用免疫学基本原理――抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及相对定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
问题五:免疫组化结果是什么意思p16基肿瘤抑制基p16基发突变缺失导致细胞异增殖终形肿瘤该病p16基阳性提示系恶性肿瘤p53基抑癌基物体内种抑制细胞转变癌细胞基功能降癌症能发Ki-67作细胞增殖标记物病理报告指数高低与许肿瘤化程度、浸润、转移及预密切相关数值越高恶性程度越高CerbB-2基种原癌基该病阴性需用赫赛汀TOP2A基阳性提示细胞增殖S期晚期G2/M期表达增加提示蒽环类药物化疗效(表阿霉素)制定化疗案参考用ER/PR别雌激素受体孕激素受体提示否需要内泌治疗该病应该做内泌治疗CK56种基底细胞角蛋白鳞状皮发层细胞、肌皮细胞、间皮细胞阳性腺皮细胞阴性p40腺癌阳性率
问题六:什么叫免疫组化?什么叫免疫组化。请问是免疫组织化学法,或者是免疫组织化学技术的简写吗?
问题七:免疫组化是什么意思免疫组化是目前临床上常用的病理学检测方法,多用于鉴别形态很相似的疾病或肿瘤,确定组织来源及研究肿瘤组织代谢改变,它包括细胞内酶学的变化、糖原的变化、核酸的变化。您的免疫组化检查结果可能是为了检测是否患有恶性淋巴瘤,淋巴细胞反应性增生可能是最后的诊断结果,即在某种因素的***下诱发了淋巴细胞的增生;也可能是淋巴瘤引发的。前者是一个良性的过程,而后者则是恶性疾病。所以,针对您的具体情况应作具体分析。也可以密切观察病情变化。
问题八:免疫组化是什么意思应用免疫学基本原理――抗原抗体反应,即抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂(荧光素、酶、金属离子、同位素)显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。
问题九:免疫组化是什么意思免疫组化就是看看癌肿细胞是什么类型的。因为不同类型肿瘤对放化疗敏感程度不同。
问题十:什么是免疫组化检查免疫组化是免疫组织化学方法的简称。临床上的免疫组化检查是指应用免疫学基本原理――抗原与抗体特异性结合,通过化学反应使标记抗体的显色剂显色,从而确定组织细胞内的抗原(多肽和蛋白质),并对其进行定位、定性及定量。
乳腺癌诊断过程中的免疫组化检查就是指应用上述免疫组化技术来检测乳腺癌组织细胞中的某些特定蛋白质。这些蛋白质的存在与否,不仅有助于确定肿瘤是哪种类型,还能够为临床医师提供乳腺癌分子分型的重要依据。这些免疫组化的检测结果反映了乳腺癌的生物学特点,具有非常重要的预测预后意义与指导治疗的价值。每一位患者的肿瘤乃至同一肿瘤的不同部分,其免疫组化的表达可能都不同。因此,乳腺癌的治疗方案不是人人相同,做免疫组化检查正是为了了解肿瘤是否具备某些特性,用以针对性地制订治疗方案,以达到最好的治疗效果。免疫组化检查结果也是评估患者复发转移风险的重要指标之一,临床医师根据这些结果综合判断手术后的后续治疗是否需要化疗、内分泌治疗或靶向治疗。如果需要化疗,那么什么药、怎么用药、用几个疗程等等问题。都需要参考包括免疫组化报告在内的各项指标来确定。因此,临床医师在制订治疗方案之前需要阅读免疫组化报告。
好了,关于免疫组化技术和免疫组化的操作步骤的问题到这里结束啦,希望可以解决您的问题哈!
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