大肠杆菌质粒(什么是大肠杆菌质粒载体)

大家好，今天小编来为大家解答大肠杆菌质粒这个问题，什么是大肠杆菌质粒载体很多人还不知道，现在让我们一起来看看吧！

如何把质粒转入大肠杆菌中

用感受态的细胞法。即用Ca2+处理，使大肠杆菌处于感受态很容易吸收周围的DNA，再将大肠杆菌与质粒混合培养，就转人。

大肠杆菌都有质粒吗

一般的话，存在自然界的大肠杆菌自身都带有质粒，质粒编码非细菌生命所必须的某些生物学性状，如性菌毛、细菌素、毒素和耐药性等。质粒具有可自主复制、传给子代、也可丢失及在细菌之间转移等特性，与细菌的遗传变异有关。但是大肠杆菌工程菌自身不带质粒。大肠杆菌中存在质粒不一定都具有抗性基因，但有抗性的大肠杆菌一般都与其具有质粒有关。

什么是大肠杆菌质粒载体

大肠杆菌质粒载体是应用最广泛的克隆载体，含有大肠杆菌源质粒的复制起始位点，能够在转化的大肠杆菌中按质粒复制的形式进行复制。pBR322是一种常用的典型质粒载体。pBR322由大肠杆菌源质粒emphasis：role=italicColemphasis：E1衍生的质粒pMB1作为出发质粒构建而成，含有emphasis：role=italicColemphasis：E1复制起始位点（Col-ori），能在大肠杆菌细胞中高拷贝复制。

pBR322具有四环素抗性基因（emphasis：role=italictetsuperscriptrsuperscriptemphasis）和氨苄青霉素抗性基因（emphasis：role=italicampsuperscriptrsuperscriptemphasis）两种抗性，作为筛选转化子的选择标记基因。在emphasis：role=italicampsuperscriptrsuperscriptemphasis基因区有限制性内切核酸酶emphasis：role=italicPstemphasisI、emphasis：role=italicScaemphasisI和emphasis：role=italicPvuemphasisI的识别序列，在emphasis：role=italictetsuperscriptrsuperscriptemphasis基因区有限制性内切核酸酶emphasis：role=italicBamemphasisHI、emphasis：role=italicSalemphasisI、emphasis：role=italicEcoemphasisRⅤ的识别序列，以及在emphasis：role=italictetsuperscriptrsuperscriptemphasis基因的启动调控区有emphasis：role=italicClaemphasisI和emphasis：role=italicHinemphasisdⅢ的识别序列。

并且这些限制性内切核酸酶在此质粒载体上只有一个识别序列，因此均可作为克隆外源DNA片段的克隆位点。pBB322分子大小为4363bp，虽然不是很小，但足以克隆10kb以下的外源DNA片段。此质粒载体主要用于基因克隆，此外也常常作为构建新克隆载体的骨架，或取其基本元件。为了便于外源DNA片段的克隆，在载体合适的位置组装一个多克隆位点（MCS）连杆，如常用的质粒载体pUC18和pUC19（link：xlinkhref=http://www.hnrlzysc.com/post/i010502图4-4link）。pUC18和pUC19两者的差别只是多克隆位点上各种克隆位点的走向相反。

设计这样一对质粒载体，便于用两种限制性内切核酸酶酶切产生的一个DNA片段以正、反两个方向组入载体，保证DNA片段中基因的信息链与质粒载体信息链连接，进行有效的表达。

关于大肠杆菌质粒，什么是大肠杆菌质粒载体的介绍到此结束，希望对大家有所帮助。

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